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怎樣製作水螅神經系統裝片

發布時間: 2022-10-16 03:30:25

① 水稻葉和水螅的橫切片製作方法,要特別的詳細!!!

水螅整體裝片的製作

目的 了解顯微鏡玻片製作的意義,學會幾種整體裝片的操作過程和方法。

實驗前的思考 整體裝片製作法,可以用於封固小形動、植物的整個身體,或個別組織和器官,所需的儀器、葯品及方法都比較簡單,製成永久裝片後能長期保存。

材料器具 水螅;玻璃缸,表面皿,吸管;70%無水乙醇,氨水,1%鹽酸,二甲苯,波因(Bouin)氏固定液,硼砂洋紅染液。

步驟

1.波因氏固定液的配製 75毫升苦味酸飽和水溶液中加入25毫升甲醛,在臨用時再加入5 毫升冰乙酸。

2.固定 固定水螅時,先在表面皿裡面放少量水,然後用吸管把水螅從培養缸中吸出,放在表面皿內。等水螅身體和觸手慢慢伸展後,用加熱的波因氏液(30~34℃)固定。固定液要多一些,傾倒時要迅速,也可用吸管吸取加熱的波因氏液澆射在水螅上,澆射的方向必須從基部到觸手端,澆射的時間必須極短,不要把固定液滴入水內,這樣水螅才不至於收縮。在波因氏固定液中固定4~8小時。

3.浸入70%乙醇中,每天更換一次70%乙醇,直到洗去標本上因固定液而染上苦味酸的黃色為止。如果需要快一些去色,可以加1~2滴氨水。

如果使用氨水去色,則在黃色除去後,仍應該換兩次70%乙醇,以除去氨水的鹼性。

4.染色 浸入硼砂洋紅染液(配製方法參見本書第836頁)中,染24小時。

5.褪色 用1%鹽酸乙醇褪色,時間為0.5~1分鍾,褪到內部器官能看清楚為止。

6.脫水 依次浸入70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇及無水乙醇。

7.透明 用二甲苯透明。中途更換一次新液,至透明為止。

8.封片 用樹膠封片,樹膠可以濃一些。

注意事項

1.製作水螅整體裝片最重要的步驟是固定,如果這一步驟處理不好,水螅的觸手和身體都會收縮,製成的標本就不能使用,所以採取有效的方法來固定是成功的關鍵。

2. 在製作水螅裝片時要非常小心,稍不注意就會弄碎或折斷觸手,特別在二甲苯中更容易弄碎或折斷,所以在整個製作過程中,盡可能少用鑷子夾鑷,也不宜多次更換盛器,最好只換溶液(如乙醇、二甲苯)不換盛器

3.褪色時,標本不能在鹽酸乙醇中停留過久,否則顏色會全部褪盡。

② 臨時裝片製作的注意事項

可以簡單的記幾個字:擦、滴、取、放、蓋、滴、吸。

擦:指的是擦玻片,防止玻片上的雜質影響觀察效果。

滴:主要指載玻片上滴加的液體。根據所做裝片不同,滴加的液體不同。

取:指取要觀察的物體。

放:將所取的物體放在載玻片液滴的中央。

蓋:指蓋蓋玻片,先使蓋玻片的一端接觸載玻片的水滴,然後慢慢的放下,防止出現氣泡影響觀察效果。

滴:這個滴指的是滴加染色液。滴到蓋玻片的一端,滴加的不宜過多。

吸:用吸水紙從蓋玻片的另一端吸引,使染液浸透所取物體。

切片,塗片,裝片三者的區別

一、作用不同

1、切片:顯微鏡進一步檢查病變,病變的發生發展過程,最後作出病理診斷。

2、塗片:檢測血液中或者組織中的包括淋球菌、新型隱球菌、梅毒螺旋體、白喉棒狀桿菌等病原體。

3、裝片:把膠片裝入放映機或攝影機片盒,以備放映或拍攝。

二、操作原理不同

1、切片:將部分有病變的組織或臟器經過各種化學品和埋藏法的處理,使之固定硬化,在切片機上切成薄片,粘附在玻片上,染以各種顏色,供在顯微鏡下檢查,以觀察病理變化。

2、塗片:在干凈的載玻片上滴上蒸餾水,用接種環進行無菌原理操作。

3、裝片:從生物體上取下來的或直接用個體微小的生物如衣藻、水螅、青黴等製成的。

三、所屬類型性質不同

1、切片:製作病理標本的一種。

2、塗片:一種特殊的檢查方法。

3、裝片:臨時和永久性。

③ 水螅的個體研究

水螅常附著生活,運動緩慢,對外界刺激有著「一發不可牽,牽之動全身」的反應特點。這種反應特點和水螅神經系統呈網狀有著密切的關系。如果我們用水螅神經網的製片方法,將其顯示出來,辨示清楚,這將使我們對水螅的神經網有較深刻的理解。因此,學會水螅神經網的製片技術,通過觀察掌握水螅神經系統特點,是本實驗的主要目的。

一、實驗准備

(一)材料 活水螅。

(二)用品 顯微鏡、表面皿(或培養皿)、載玻片、蓋玻片、吸管(多個)、 8號針頭、注射器(10 mL)、搪瓷盤、無水乙醇、茜素、碳酸氫鈉、福爾馬林、二甲苯、生石灰、中性樹膠。

(三)葯液配製

1.茜素酒精溶液 在體積分數為70%的酒精中加入茜素(加入量根據染色深淺的需要而定),再加少許碳酸氫鈉,使之成飽和溶液,用時去掉沉澱只用上清液。製片時一定要現用現配。

2.飽和石灰水——福爾馬林溶液 飽和石灰水3份,去掉沉澱後與市售福爾馬林液1份混合。

3.一系列體積分數不同的酒精 需配70%、80%、90%、95%、100%各級體積分數,在每級酒精溶液中,也要加入少許碳酸氫鈉,使各級酒精呈弱鹼性或中性,便於神經細胞能順利地染色。

4.酒精與二甲苯混合液 1份純酒精和1份二甲苯混合而成。

二、方法步驟

(一)選個體小的水螅,以避免製片後水螅呈彎曲狀,選出的水螅要飢餓l~2d,防止食物殘渣在製片中沉積,影響觀察效果。

(二)製片前0.5~l h,用吸管把水螅吸到表面皿中,加少量清水,待水螅附著伸展充分時,用注射器吸2 mL菌素酒精溶液,從水螅基盤向觸手端快速噴出葯液,以期盡快殺死水螅。操作時最好一人噴殺,另一人協助傾斜表面皿,以便把皿內的清水隨著噴葯而倒出,盡量保持染液中的酒精濃度。

(三)水螅殺死後,朝表面皿中再加菌素酒精溶液,浸沒水螅,這時要將表面皿移到顯微鏡下,以便觀察。水螅神經細胞染色情況,在大約 15~30 min時間內,如果在顯微鏡下能看到紫紅色網狀結構,神經細胞邊界清晰,界內染色適宜不顯中空,神經細胞突起相連特點明顯,這時就要用吸管移去染液。

(四)如果一切順利,神經網顯示清晰,加些體積分數為70%的酒精洗去浮色即可。如果確認染色過深,就要加體積分數為70%的酒精去色到適度為止。

(五)倒掉表面皿中的酒精,加入約2 mL石灰水一福爾馬林溶液,約 5~10 min;倒掉石灰水一福爾馬林溶液,再用體積分數為70%的酒精洗2次。

(六)用酒精對水螅進行脫水要從低濃度向高濃度逐步展開。先從體積分數為70%的酒精開始,浸泡 10 min後,用干凈、乾燥的吸管盡量吸凈葯液;再加人體積分數為80%的酒精,仍然是浸泡 10 min後,用另一支幹凈、乾燥吸管將葯液吸走;依此類推,用體積分數為90%、95%、100%的酒精分別對水螅進行脫水,在體積分數為100%的酒精中要連續脫水2次。吸走葯液後,換人體積分數為100%的酒精與二甲苯混合液,浸泡 10 min後再換入二甲苯,做最後一道脫水程序,10 min後用吸管將標本從表面皿中吸到干凈、乾燥的載玻片上,調好位置,滴加中性樹膠封片。

(七)將封片後的載片平放在搪瓷盤內,然後放進乾燥溫箱中 進行烘乾,經l~2周後,檢查裝片確已乾燥,就可貼上標簽供觀察用。

由於本方法可使水螅神經細胞和上皮肌細胞均被染色,這樣在觀察中就有一個如何區分這兩種細胞的問題。將制好的裝片放在低倍鏡下觀察,從視野中找出網狀結構顯示清楚之處,將其放置在視野中央後,轉換成高倍鏡,在視野中如果看到細胞邊界清晰,界內色深些不顯中空,突起相連構成網狀的細胞,就是神經細胞。

三、教學建議

本實驗殺死水螅時,要求自基盤向觸手方向噴葯;染色時,要在顯微鏡下邊觀察邊判斷適宜度;脫水置換葯液時,上一級葯液要盡可能吸干凈;觀察時,要尋找細胞界內染色適宜不顯中空,突起相連構成網狀的部位。這些都是關鍵步驟,萬勿馬虎從事

④ 在研究池塘水時我們製作裝片的方法是什麼

您好,以下是製作臨時裝片的過程:
先把載玻片清洗干凈,再在上面滴水(如果是製作生物裝片就滴生理鹽水,是植物就滴清水);
再用夾子把所要觀察的東西放在水滴中;
再用夾子把蓋玻片蓋住觀察物(此處要緩慢,避免出現氣泡,影響觀察);
最後用稀碘液進行染色。
裝片指把膠片裝入放映機或攝影機片盒,以備放映或拍攝。也可作從生物體上取下來的或直接用個體微小的生物如衣藻、水螅、青黴等製成的。在要用顯微鏡觀察物體的時候,將被觀察物體放在載玻片上就叫裝片。

⑤ 製作臨時裝片的過程及步驟

一擦二滴三取四浸五蓋六染七吸

1、擦凈載玻片


分類:

裝片(LOADING)也可作從生物體上取下來的或直接用個體微小的生物如衣藻、水螅、青黴等製成的。在要用顯微鏡觀察物體的時候,將被觀察物體放在載玻片上就叫裝片。

臨時裝片就是將要用顯微鏡觀察的事物臨時做成裝片。臨時裝片是從生物體上撕取或挑取的材料製成的,製成的臨時裝片包括載玻片組織材料蓋玻片。

永久裝片一般是在廠家裡面製作的,裝片上會有一些密封物質把載玻片和蓋玻片封起來,一般是長期反復使用,用做樣板。

以上內容參考網路-臨時裝片

⑥ 觀察水螅永久裝片的實驗原理

等它身體完全伸展以後用放大鏡觀察,可看到它的身體呈指狀圓筒型,長約1厘米,附著在物體上的一端稱為基盤,身體呈指狀,肉眼可以看見。以上就是觀察水螅永久裝片的實驗原理

⑦ 水螅的模型製作材料老師要求自製水媳模型才料要好找

使用吸管製作,或者聚氨酯注模