‘壹’ 【求助】如何设计液相分析的梯度
以反相色谱柱为例，首先你需要确定一下你所分析物质的出峰时间，然后将保留时间相隔较长的组分间提高甲醇比例，对于分不开的要降低甲醇比例，然后设定梯度时间。 我自己是这样做的，在不同比例下进行分析，看那些物质的分离趋势，有的可能是在甲醇比例高时分得很好，有的是在甲醇比例低时分得很好，这时就可以据此设计梯度条件了，刚做不久，仅供参考
‘贰’ 液相梯度洗脱设置问题
呵呵
，你说能看明白。你举这个例子不是特别的恰当了。我给我举个例子，希望能帮助你。
时间
A
B
0
80
20
10
10
90
14
10
90
14.1
80
20
20
80
20
这个例子能说明你的问题，前面0-10分钟采用的梯度是等比例的把A80%和B20%变换成A10%和B90%，而当10分钟时，已经变换成了A10%和B90%，这只是梯度变换成了这个比例，实际上，因为液相色谱的死时间问题，在柱子中的比例还没到这样的比例，再就是现在这个比例应该是有机相最多的时候，这时会把一些难于洗脱的物质洗脱出来，一般还需要几分钟的时间吧，然后过了四分钟，觉得洗脱完全了，就在14.1分钟立即把梯度换成了A80%和B20%，接下来其实现在已经不在分析样品了，是在平衡系统了。在实际运行中，我做的这个梯度只有14分钟再加上大约2分钟的死时间，也就是说大约16分钟的时间是整个样品中的谱图正常时间，16分钟之后不可能再有峰出来了，如果有峰说明方法梯度设置有问题了。
而你上面的梯度其实是个等度，设置这个梯度没意义，可以都删除，直接在AB泵上设置就行了。
‘叁’ 高效液相色谱的梯度洗脱实验具体操作如何在工作站上如何设置参数
你说的俩流动相分别为15%和60%我不太了解，我暂时以我的方法来描述一下，
比如说a相是100%乙腈
，b
是水。
在参数设置栏里找到平时用的等梯度洗脱，有个下拉箭头，选择另一个选项，就是双泵洗脱模式
然后下面有选择a泵b泵分别是多少的，这是初始状态下的流动相比例，比如开始是a相15%
你就填上a
15%
同时b就是85%
，因为总量一定是100%的，这时候流动相就相当于15%的乙腈。
然后在标签上找到时间程序设置，下面有个表格，
最左边是时间，横向第二格是控制栏，
选择pump也就是泵，你可以选择pumpa或者pumpb，然后第三格就是选择pumpa的流动相比例，你可以自己填写需要多少比例
比如：
时间
泵选择
流动相比例
0.01
pumpa
15
10.00
pumpa
60
10.01
event
stop
这就是说a泵的流动相比例从开始到10分钟从15%匀速增长为60%
在10.01时间
操作完成
，具体命令好像是这个，我有点记不清了
设置完成后要在后面选择加载曲线按钮，并且保存方法，然后再开始。
‘肆’ 岛津液相色谱仪梯度程序怎么设置
做实验时，需要设置梯度洗脱。对于组分复杂的样品，采用一种色谱体系，往往很难得到理想的分离效果，要么分离时间太长，要么分离度太差。这种情况，采用梯度洗脱就可以缩短分析时间，提高分离效果。1仪器岛津LC2010CHT型高效液相色谱仪（四元泵、在线脱气、自动冷却装置、全自动进样器、紫外检测器)：梅特
勒-托利多AB135-S双量程电子天平；超声波清洗器。色；实验用水采用双重燕馏水；其它试剂均为分析纯。进行高效液相色谱分析时，两种洗脱方法：等度洗脱和梯度洗脱。等度洗脱是由不同溶剂构成的固定比例的流动相，在整个洗脱过程中，流动相的极性、离子强度、DH值等因素皆保持不变。对于较复杂的中药成分来说，只单纯的用等度洗脱来分析中药的成分，显然有些力不从心，为此采用梯度洗脱，在此过程中可调节流动相的极性，改善样品中每个组分的分离度从而达到彻底分离的目的。
‘伍’ 如何设置反相色谱中的梯度
反相色谱应该就是HPLC， 直接在仪器界面或者电脑程式界面设定。中文在“泵”英文在"pump" 框架中，选择“高级”，在“高级”框架中设定各个时段，以及每个时段中流动相的百分比。一般默认A路为100%
‘陆’ 液相色谱时间如何修改
改出峰时间的方法：1.调流速；2.改柱温；3.更换色谱柱；4.更改流动相组成或比例。 改工作站系统时间（仅进样前改有效，通常用于作弊造假）：在电脑管理员界面（像我们公司就分管理员界面和操作者界面，平时做检验都是在操作者界面中）的控制面板中修改系统时间即可。记得做完样打完图谱之后把系统时间改回来。
‘柒’ 请教高人，反相高效液相色谱中保留时间怎么调我想推迟保留时间，我的流动相里有机溶剂只占百分之一。
一、降低流速；
二、调整流动相的极性；具体怎么调要看你所用的流动而定。
三、换长柱。
‘捌’ 高效液相色谱的梯度洗脱实验具体操作如何在工作站上如何设置参数
高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显着地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
(8)反相液相梯度时间怎样设置扩展阅读：
cs—溶质在固定相中浓度；cm—溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处，即分离的顺序取决于K，K大的组分保留值大；但也有不同之处，GPC中，流动相对K影响不大，LLPC流动相对K影响较大。
正相液-液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。反相液-液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
‘玖’ 液相梯度走的缓一些，怎样设置
是希望走缓一点儿吗？
一个是 水，最好是纯度很高的纯净水。如果是外面买的，起码是娃哈哈纯净水，最好用屈臣氏的绿色瓶子的那种。如果是自制的也最好是一级水。
一个是有机相，梯度的时候就不要随便了，最好用国外进口的有机相。跑出来效果会好一些。比如Fisher的什么的。
一个是盐。这个可能没办法，实验室也只有分析纯的盐了。不过要多过滤几次。
另外有些时候梯度就是波动大，比如有机相变化非常大的时候。这个是不好调解的。
另外都是缓冲液的时候醋酸盐比磷酸盐波动也要大很多。这个就看你的实验需要了。
当然，低波长的时候波动范围也会大一些。如果方法是固定的，那么这些都是不能改变的了。
‘拾’ 安捷伦液相色谱梯度洗脱怎么设置时间表
咨询记录 · 回答于2021-10-13