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怎样制作水螅神经系统装片

发布时间: 2022-10-16 03:30:25

① 水稻叶和水螅的横切片制作方法,要特别的详细!!!

水螅整体装片的制作

目的 了解显微镜玻片制作的意义,学会几种整体装片的操作过程和方法。

实验前的思考 整体装片制作法,可以用于封固小形动、植物的整个身体,或个别组织和器官,所需的仪器、药品及方法都比较简单,制成永久装片后能长期保存。

材料器具 水螅;玻璃缸,表面皿,吸管;70%无水乙醇,氨水,1%盐酸,二甲苯,波因(Bouin)氏固定液,硼砂洋红染液。

步骤

1.波因氏固定液的配制 75毫升苦味酸饱和水溶液中加入25毫升甲醛,在临用时再加入5 毫升冰乙酸。

2.固定 固定水螅时,先在表面皿里面放少量水,然后用吸管把水螅从培养缸中吸出,放在表面皿内。等水螅身体和触手慢慢伸展后,用加热的波因氏液(30~34℃)固定。固定液要多一些,倾倒时要迅速,也可用吸管吸取加热的波因氏液浇射在水螅上,浇射的方向必须从基部到触手端,浇射的时间必须极短,不要把固定液滴入水内,这样水螅才不至于收缩。在波因氏固定液中固定4~8小时。

3.浸入70%乙醇中,每天更换一次70%乙醇,直到洗去标本上因固定液而染上苦味酸的黄色为止。如果需要快一些去色,可以加1~2滴氨水。

如果使用氨水去色,则在黄色除去后,仍应该换两次70%乙醇,以除去氨水的碱性。

4.染色 浸入硼砂洋红染液(配制方法参见本书第836页)中,染24小时。

5.褪色 用1%盐酸乙醇褪色,时间为0.5~1分钟,褪到内部器官能看清楚为止。

6.脱水 依次浸入70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇及无水乙醇。

7.透明 用二甲苯透明。中途更换一次新液,至透明为止。

8.封片 用树胶封片,树胶可以浓一些。

注意事项

1.制作水螅整体装片最重要的步骤是固定,如果这一步骤处理不好,水螅的触手和身体都会收缩,制成的标本就不能使用,所以采取有效的方法来固定是成功的关键。

2. 在制作水螅装片时要非常小心,稍不注意就会弄碎或折断触手,特别在二甲苯中更容易弄碎或折断,所以在整个制作过程中,尽可能少用镊子夹镊,也不宜多次更换盛器,最好只换溶液(如乙醇、二甲苯)不换盛器

3.褪色时,标本不能在盐酸乙醇中停留过久,否则颜色会全部褪尽。

② 临时装片制作的注意事项

可以简单的记几个字:擦、滴、取、放、盖、滴、吸。

擦:指的是擦玻片,防止玻片上的杂质影响观察效果。

滴:主要指载玻片上滴加的液体。根据所做装片不同,滴加的液体不同。

取:指取要观察的物体。

放:将所取的物体放在载玻片液滴的中央。

盖:指盖盖玻片,先使盖玻片的一端接触载玻片的水滴,然后慢慢的放下,防止出现气泡影响观察效果。

滴:这个滴指的是滴加染色液。滴到盖玻片的一端,滴加的不宜过多。

吸:用吸水纸从盖玻片的另一端吸引,使染液浸透所取物体。

切片,涂片,装片三者的区别

一、作用不同

1、切片:显微镜进一步检查病变,病变的发生发展过程,最后作出病理诊断。

2、涂片:检测血液中或者组织中的包括淋球菌、新型隐球菌、梅毒螺旋体、白喉棒状杆菌等病原体。

3、装片:把胶片装入放映机或摄影机片盒,以备放映或拍摄。

二、操作原理不同

1、切片:将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理,使之固定硬化,在切片机上切成薄片,粘附在玻片上,染以各种颜色,供在显微镜下检查,以观察病理变化。

2、涂片:在干净的载玻片上滴上蒸馏水,用接种环进行无菌原理操作。

3、装片:从生物体上取下来的或直接用个体微小的生物如衣藻、水螅、青霉等制成的。

三、所属类型性质不同

1、切片:制作病理标本的一种。

2、涂片:一种特殊的检查方法。

3、装片:临时和永久性。

③ 水螅的个体研究

水螅常附着生活,运动缓慢,对外界刺激有着“一发不可牵,牵之动全身”的反应特点。这种反应特点和水螅神经系统呈网状有着密切的关系。如果我们用水螅神经网的制片方法,将其显示出来,辨示清楚,这将使我们对水螅的神经网有较深刻的理解。因此,学会水螅神经网的制片技术,通过观察掌握水螅神经系统特点,是本实验的主要目的。

一、实验准备

(一)材料 活水螅。

(二)用品 显微镜、表面皿(或培养皿)、载玻片、盖玻片、吸管(多个)、 8号针头、注射器(10 mL)、搪瓷盘、无水乙醇、茜素、碳酸氢钠、福尔马林、二甲苯、生石灰、中性树胶。

(三)药液配制

1.茜素酒精溶液 在体积分数为70%的酒精中加入茜素(加入量根据染色深浅的需要而定),再加少许碳酸氢钠,使之成饱和溶液,用时去掉沉淀只用上清液。制片时一定要现用现配。

2.饱和石灰水——福尔马林溶液 饱和石灰水3份,去掉沉淀后与市售福尔马林液1份混合。

3.一系列体积分数不同的酒精 需配70%、80%、90%、95%、100%各级体积分数,在每级酒精溶液中,也要加入少许碳酸氢钠,使各级酒精呈弱碱性或中性,便于神经细胞能顺利地染色。

4.酒精与二甲苯混合液 1份纯酒精和1份二甲苯混合而成。

二、方法步骤

(一)选个体小的水螅,以避免制片后水螅呈弯曲状,选出的水螅要饥饿l~2d,防止食物残渣在制片中沉积,影响观察效果。

(二)制片前0.5~l h,用吸管把水螅吸到表面皿中,加少量清水,待水螅附着伸展充分时,用注射器吸2 mL菌素酒精溶液,从水螅基盘向触手端快速喷出药液,以期尽快杀死水螅。操作时最好一人喷杀,另一人协助倾斜表面皿,以便把皿内的清水随着喷药而倒出,尽量保持染液中的酒精浓度。

(三)水螅杀死后,朝表面皿中再加菌素酒精溶液,浸没水螅,这时要将表面皿移到显微镜下,以便观察。水螅神经细胞染色情况,在大约 15~30 min时间内,如果在显微镜下能看到紫红色网状结构,神经细胞边界清晰,界内染色适宜不显中空,神经细胞突起相连特点明显,这时就要用吸管移去染液。

(四)如果一切顺利,神经网显示清晰,加些体积分数为70%的酒精洗去浮色即可。如果确认染色过深,就要加体积分数为70%的酒精去色到适度为止。

(五)倒掉表面皿中的酒精,加入约2 mL石灰水一福尔马林溶液,约 5~10 min;倒掉石灰水一福尔马林溶液,再用体积分数为70%的酒精洗2次。

(六)用酒精对水螅进行脱水要从低浓度向高浓度逐步展开。先从体积分数为70%的酒精开始,浸泡 10 min后,用干净、干燥的吸管尽量吸净药液;再加人体积分数为80%的酒精,仍然是浸泡 10 min后,用另一支干净、干燥吸管将药液吸走;依此类推,用体积分数为90%、95%、100%的酒精分别对水螅进行脱水,在体积分数为100%的酒精中要连续脱水2次。吸走药液后,换人体积分数为100%的酒精与二甲苯混合液,浸泡 10 min后再换入二甲苯,做最后一道脱水程序,10 min后用吸管将标本从表面皿中吸到干净、干燥的载玻片上,调好位置,滴加中性树胶封片。

(七)将封片后的载片平放在搪瓷盘内,然后放进干燥温箱中 进行烘干,经l~2周后,检查装片确已干燥,就可贴上标签供观察用。

由于本方法可使水螅神经细胞和上皮肌细胞均被染色,这样在观察中就有一个如何区分这两种细胞的问题。将制好的装片放在低倍镜下观察,从视野中找出网状结构显示清楚之处,将其放置在视野中央后,转换成高倍镜,在视野中如果看到细胞边界清晰,界内色深些不显中空,突起相连构成网状的细胞,就是神经细胞。

三、教学建议

本实验杀死水螅时,要求自基盘向触手方向喷药;染色时,要在显微镜下边观察边判断适宜度;脱水置换药液时,上一级药液要尽可能吸干净;观察时,要寻找细胞界内染色适宜不显中空,突起相连构成网状的部位。这些都是关键步骤,万勿马虎从事

④ 在研究池塘水时我们制作装片的方法是什么

您好,以下是制作临时装片的过程:
先把载玻片清洗干净,再在上面滴水(如果是制作生物装片就滴生理盐水,是植物就滴清水);
再用夹子把所要观察的东西放在水滴中;
再用夹子把盖玻片盖住观察物(此处要缓慢,避免出现气泡,影响观察);
最后用稀碘液进行染色。
装片指把胶片装入放映机或摄影机片盒,以备放映或拍摄。也可作从生物体上取下来的或直接用个体微小的生物如衣藻、水螅、青霉等制成的。在要用显微镜观察物体的时候,将被观察物体放在载玻片上就叫装片。

⑤ 制作临时装片的过程及步骤

一擦二滴三取四浸五盖六染七吸

1、擦净载玻片


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装片(LOADING)也可作从生物体上取下来的或直接用个体微小的生物如衣藻、水螅、青霉等制成的。在要用显微镜观察物体的时候,将被观察物体放在载玻片上就叫装片。

临时装片就是将要用显微镜观察的事物临时做成装片。临时装片是从生物体上撕取或挑取的材料制成的,制成的临时装片包括载玻片组织材料盖玻片。

永久装片一般是在厂家里面制作的,装片上会有一些密封物质把载玻片和盖玻片封起来,一般是长期反复使用,用做样板。

以上内容参考网络-临时装片

⑥ 观察水螅永久装片的实验原理

等它身体完全伸展以后用放大镜观察,可看到它的身体呈指状圆筒型,长约1厘米,附着在物体上的一端称为基盘,身体呈指状,肉眼可以看见。以上就是观察水螅永久装片的实验原理

⑦ 水螅的模型制作材料老师要求自制水媳模型才料要好找

使用吸管制作,或者聚氨酯注模